警惕维生素B12假性增高的巨幼细胞贫血

79岁唐阿姨，血常规检查结果呈三系减低，血红蛋白（Hb）结果仅36g/L，红细胞体积明显增大(MCV=117fL)。外周血涂片红细胞大小不等、可见大红细胞和少量泪滴状红细胞；中性粒细胞分叶见5叶以上细胞，疑巨幼细胞性贫血可能。

巨幼细胞性贫血（以下简称巨幼贫），是一种营养不良性贫血，主要因为体内缺乏叶酸、维生素B12所致。然而唐阿姨血清检测叶酸和维生素B12浓度时叶酸正常，维生素B12结果（1228.57pg/ml）不但没有降低反而增高。进一步采用骨髓形态检测(巨幼贫诊断的形态学金标准)，可见红细胞系巨幼细胞性变化，符合巨幼贫诊断。

该患者巨幼贫诊断明确，为什么维生素B12检测结果不降低反而增高？有无假性增高可能？要弄清楚这一问题，我们需要了解维生素B12在体内的代谢情况，并分析导致维生素B12假性增高的可能原因，找到真相。

首先，我们需要关注患者体内同型半胱氨酸(Hcy)浓度是否升高？

由于叶酸和VB12是Hcy代谢过程中的重要辅酶，故叶酸或VB12缺乏导致 Hcy分解代谢障碍，必然会引起Hcy在体内堆积，导致高 Hcy血症。检查发现患者血清Hcy结果为56.6umol/L,高于参考范围上限（15umol/L），存在VB12或叶酸假性升高可能。查看标本不溶血，先暂时排除叶酸假性增高的可能，首先关注VB12的结果是否可靠。

为了证实我们的想法，采用PEG沉淀法对血清进行去除干扰后进行VB12检测。我们采用25%浓度的PEG对患者血清和正常血清（阴性对照）进行沉淀后再检测。患者血清检测结果回收率6.5%，同时阴性对照的回收率61.9%，检测样本与阴性对照回收率有明显差异，证实VB12结果有干扰，直接测定结果不准确。

其次，我们需要检测患者体内是否存在内因子抗体？

内因子抗体（IFAb）会阻碍人体VB12 在回肠的吸收, VB12 吸收障碍会导致其在体内VB12 水平下降，理论上该患者体内内因子抗体阳性，血清VB12浓度应该降低。 但是目前常规检测VB12所采用的检测方法是免疫竞争化学发光法（如图1）。当体内存在内因子抗体时，血清中的VB12 与内源性内因子抗体会竞争性结合VB12 结合蛋白(纯化的内因子)（如图1,2所示）。内因子阻断抗体会结合反应体系中的内因子试剂,造成被测血清中维生素 B12 水平假性升高。 

该患者内因子抗体结果为243.57U/ml（参考值<20U/ml）。通过高Hcy血症和内因子抗体（IFAb）阳性两项检测结果，我们基本可以判断唐阿姨血清VB12浓度是假性升高。为了得出准确的结果，我们将样本外送试剂公司，采用更为精准的抗干扰试剂进行检测，VB12结果为53.54pg/ml，已明显低于参考值下限（180pg/ml）。真相大白，初次检测的VB12结果是假性升高，患者体内VB12是缺乏的。

维生素B12假性升高的实验室检测报告，您能正确解读了吗？

作者：彭秀娟

编辑：杜乔乔

初审：张瀚文  审核：邓金林、党好